Twilight Sparkle jest jednorożcem pochodzącym z Canterlotu. Jest w kolorze jasnofioletowym z ciemnofioletową grzywą. Ogon Twilight Sparkle ma różowy i fioletowy pasek.
Znaczkiem Twilight Sparkle jest duża różowa gwiazda otoczona pięcioma mniejszymi białymi gwiazdkami. Twilight Sparkle jest siostrą Shining Armora. Jest także najlepszą uczennicą Księżniczki Celestii.
Jej talentem a zarazem największym zamiłowaniem jest nauka magii. Twilight Sparkle jest doskonałą organizatorką o duszy symbolizującej magię.
Począwszy od 24. odcinka posiada sowę o imieniu Sowalicja, która pomaga Twilight Sparkle w nocnych pracach.
W ostatnim odcinku 3. sezonu Twilight Sparkle udowadnia, że wie już wszystko o magii przyjaźni, co powoduje, że zostaje przemieniona w alicorna czyli skrzydlatego jednorożca i staje się czwartą po Celestii, Lunie i Cadance księżniczką Equestrii.